作為不僅可用于小分子物質(zhì)的分離和鑒定,而且可以用來分析化學(xué)性質(zhì)相同分子體積不同的高分子同系物的方法,
凝膠滲透色譜法利用聚合物在分離柱上按分子流體力學(xué)體積大小被分離開,從而對(duì)樣品物質(zhì)進(jìn)行檢測分離。
分離原理:由于凝膠具有化學(xué)惰性,而且不具有吸附、分配和離子交換作用。通過讓樣品的高聚物溶液經(jīng)過一根內(nèi)裝不同孔徑的色譜柱,再通過色譜柱上可供分子通行的路徑有粒子間的間隙較大和粒子內(nèi)的通孔較小的多種通道。當(dāng)樣品物質(zhì)的聚合物溶液流經(jīng)色譜柱時(shí),其中體積大于凝膠孔隙的較大分子則無法通過粒子的小孔,并得從粒子間的間隙通過,這一通過速率較快。而當(dāng)樣品的高聚物溶液中較小的分子可以進(jìn)入粒子中的小孔,并且經(jīng)過通行的速率會(huì)相對(duì)較慢。此外,中等體積的分子可以滲入較大的孔隙中,但受到較小孔隙的排阻,介乎上述兩種情況之間。經(jīng)過一定長度的色譜柱,分子根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量被分開,相對(duì)分子質(zhì)量大的在前面,相對(duì)分子質(zhì)量小的在后面。自試樣進(jìn)柱到被淋洗出來,所接受到的淋出液總體積稱為該試樣的淋出體積。以上便是凝膠滲透色譜的分離原理。
校正原理:與其他精密檢測分析儀器一樣,凝膠滲透色譜也需要進(jìn)行校正。通過采用用已知相對(duì)分子質(zhì)量的單分散標(biāo)準(zhǔn)聚合物,然后預(yù)先做一條淋洗體積或淋洗時(shí)間和相對(duì)分子質(zhì)量對(duì)應(yīng)關(guān)系曲線,變得到校正曲線。聚合物中幾乎找不到單分散的標(biāo)準(zhǔn)樣,一般用窄分布的試樣代替。在相同的測試條件下,做一系列的凝膠滲透色譜標(biāo)準(zhǔn)譜圖,對(duì)應(yīng)不同相對(duì)分子質(zhì)量樣品的保留時(shí)間,從而得到校正曲線。通過校正曲線,就能從凝膠滲透色譜譜圖上計(jì)算各種所需相對(duì)分子質(zhì)量與相對(duì)分子質(zhì)量分布的信息。但這種校正方法對(duì)于沒有標(biāo)準(zhǔn)較的聚合物,便沒法得到校正曲線。